Antropogenética - Actividad 7
Diseño de una reacción PCR - Resultado
En la primera PCR probablemente teníamos poco MgCl2, poca Taq, una temperatura de anillamiento alta, o una combinación de estos factores, ya que no aparecieron bandas.
En la segunda PCR teníamos mucho MgCl2, mucha Taq, una temperatura de anillamiento baja, o una combinación de estos factores, ya que aparecieron demasiadas bandas.
En la tercera PCR estábamos cerca de la solución, todavía con un pequeño exceso de bandas. Una solución posible sería:
Mix PCR:
Volumen |
|
Buffer |
1 µl |
MgCl2 |
0,5µl |
dNTPs |
0,2 µl |
Glicerol |
0,5 µl |
Cebador 1 |
0,2 µl |
Cebador 2 |
0,2 µl |
H2O |
6,1µl |
Taq polimerasa |
0,3µl |
ADN |
1 µl |
Programación del termociclador:
Tiempo |
Temperatura |
10 min. |
94 ºC |
1 min. (x30) |
94 ºC |
1 min. (x30) |
65 ºC |
1 min. (x30) |
72 ºC |
10 min. |
72 ºC |
indefinido |
4 ºC |
Resultado:
@Jose A. Peña, 2012